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dihifh   发表于 2017-7-13 19:01:40 |栏目:仪器资料
  • 资料类型 :操作经验 
  • 资源级别: 三星以上
  • 文件类型 : pdf 
  • 适合人群 : 初学者
  • 关联厂家 : 沃特世
  • 仪器型号: 2695-2489HPLC
沃特世2695-2489HPLC 系统操作规程
新色谱柱的安装和平衡
使用新色谱柱前需要对色谱柱进行润湿和平衡,注意确保您所使用的流动相和色谱柱储存溶剂“相溶”。Symmetry/Sunfire反相色谱柱是在100%乙腈中储存的。
a)依次用水和乙腈(或甲醇)冲洗液相色谱泵系统中含有 缓冲盐的流路,然后将色谱柱按照标签上的箭头方向`` 连接到进样器或保护柱的出口端,标签上的箭头指向 检测器流向(先不要接检测器)。
b)在0.1ml/min流速条件下用100%纯甲醇或乙腈冲洗色谱 柱,然后在5分钟内将流速升至1 ml/min。
c)当溶液均匀地从柱子出口流出时,停掉流速,将色谱柱 出口端接到检测器上(这样操作可以避免气泡进入检 测系统,并且可快速达到基线平衡)。
d)按照步骤b)的方法逐渐提高流速。
e)当压力达到稳定值并且基线平稳后,缓慢降低流速,停泵。
f)用5:95乙腈:水(体积比)冲洗色谱柱30分钟(注意流速 要从0.1 ml/min缓慢上升至1 ml/min)。
g)换上含有离子对试剂的流动相,对色谱柱进行平衡,直 到基线平稳 。
h)进标准溶液和样品溶液进行分析。

色谱柱的再生
n 保留时间漂移或者分离度发生变化往往说明色谱柱被污染了,用纯有机溶剂(乙腈或甲醇)冲洗色谱柱通常可以洗去污染物。
n 根据样品的干净程度定期更换保护柱,压力逐渐增加或者出现分叉峰往往表明需要更换保护柱了。如果保护柱更换后问题依然存在,说明色谱柱被强吸附的污染物堵塞,这时需要选择合适的溶剂来溶解这些污染物,比如,变性蛋白可以通过反复几次进200μl DMSO来清洗。
n 如果上述方法还是不能解决问题,可以换用一系列疏水性逐渐增强的溶剂来清洗色谱柱。更换溶剂的顺序可以为:水-四氢呋喃-二氯甲烷-四氢呋喃-水。

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lxm3625725

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lxm3625725   发表于 2017-7-21 14:07:58 |栏目:仪器资料
這個資源非常需要,支持一起下吧!

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tangzhichun

氦级

tangzhichun   发表于 2017-8-2 09:56:44 |栏目:仪器资料
么有分,谁能送我点搬砖数值啊::>_<::

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edwinkmw

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edwinkmw   发表于 2017-8-16 16:25:40 |栏目:仪器资料
這麼好的帖子都沒有人頂!d=====( ̄▽ ̄*)b,我來多頂頂樓主

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chenghongji

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chenghongji   发表于 2017-9-1 17:53:44 |栏目:仪器资料
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seed007

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seed007   发表于 2017-9-26 02:07:26 |栏目:仪器资料
啥也不说了,感谢一起下吧和楼主的分享哇!

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注册不了?

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注册不了?   发表于 2017-10-20 19:31:10 |栏目:仪器资料
這麼好的帖子都沒有人頂!d=====( ̄▽ ̄*)b,我來多頂頂樓主

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wangzsbuct2004

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wangzsbuct2004   发表于 2018-8-4 22:33:11 |栏目:仪器资料
我帶著醬油瓶路過一起下吧的,還是忍不住小手一抖!

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zike7810

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zike7810   发表于 2018-9-24 03:16:19 |栏目:仪器资料
确实是难得好帖啊,讓我涕流滿面,頂頂一起下吧先

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xiaoxia

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xiaoxia   发表于 2018-11-12 19:32:24 |栏目:仪器资料
额,為神馬現在才發現一起下吧的資源啊[email protected][email protected]

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