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winnix   发表于 2017-8-22 14:13:34 |栏目:仪器资料
  • 资料类型 :维护维修 
  • 资源级别: 三星以上
  • 文件类型 : doc,docx 
  • 适合人群 : 初学者
  • 关联厂家 :
  • 仪器型号:
HPLC常见故障排除完美版

高效液相色谱仪的几个使用问题
1. 色谱柱中的流动相会排干吗?
不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形:不慎未及时补充流动相,泵将溶剂瓶中的流动相吸干了,HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱?泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了?色谱柱还能使用吗?事实上,如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干,并不会造成色谱柱的损坏。即使泵中充满了空气,泵也不会将空气排入色谱柱。因为泵只能输送液体,而不能输送空气。相比之下,另一个更可能发生的情况是忘记盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。同样,整个色谱柱干涸的情况不太容易发生,多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了,因挥发掉所有溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间。即使色谱柱真的变干了,也不一定就不可救药了。可以尝试用一种完全脱气的、表面张力低的溶剂(如经氦气脱气的甲醇)冲洗色谱柱以除去气体。较低的表面张力有助于浸润填料表面;已脱气的溶剂应该能够溶解并去除滞留在填料中的气体。色谱柱大约需要(以1mL/min的流速)冲一个小时或更多的时间被彻底浸润,恢复到正常状态。
2. 使用PEEK(polyetheretherketone)管路和接头需要注意什么问题?
如果经常需要改变流路或更换不同品牌的色谱柱,使用PEEK材料制成的管路和接头会非常方便。PEEK管路容易连接;PEEK接头不仅无需工具,手拧即可固定,而且容易调节锥箍之外的管路长度,方便与不同品牌或规格的色谱柱相连接。
使用此类材料的管路需要注意的是:PEEK对卤代烷烃和四氢呋喃的兼容性不好。虽然未观察到上述溶剂溶解PEEK材料的明显迹象,但PEEK遇到上述溶剂会变脆。另一个西药考虑的因素是压力限。不锈钢管可耐受6000psi的压力,但PEEK管只能耐受近4000psi(但多数HPLC应用系统压力不会超过3000psi)。
使用PEEK接头时则无需担心接头耐溶剂性能,因为接头几乎或很少与溶剂直接接触。但手拧固定的PEEK接头压力限低于不锈钢管,因而压力太高时,可能会使接头在管路上滑动而产生死体积或漏液。
3. 如何预防液相泵的故障:
要保持泵的良好操作性能,必须维护系统的清洁,保证溶剂和试剂的质量,对流动相进行过滤和脱气.下面列出预防泵故障的几项措施:
1).用高质量试剂和HPLC级溶剂;
2)、过滤流动相和溶剂;
3)、脱气;
4)、每天开始使用时放空排气,工作结束后从泵中洗去缓冲液;
5)、不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中;
6)、定期更换垫圈;
7)、需要时加润滑油;
8)、查阅有关泵操作手册中的其它建议。
秘诀1:由强到弱: 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试 验, 这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。秘诀2 三倍规则 :每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量,保留因子约增加3倍,此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中,注意观察各个峰的分离情况。秘诀3 粗调转微调:当分离达到一定程度,应将有机溶剂10%的改变量调整为5%,并据此规则逐渐降低调整率,直至各组分的分离情况不再改变。
檢量線的種類有哪些? 通常校正之檢量線大概可以分為兩大類: 線性(linear)與非線性(nonlinear). 線性校正檢量線為直線通過原點(0,0)的零次校正,和不通過原點的一次校正. 而非線性校正則為二次校正或更高次的校正. 今天的重點則是放在最常使用的線性校正上.線性校正在實際的使用時,最常見的就是"線性回歸校正法"(linear regression), 感應因子法(內標法)及校正因子(外標法)等三種.


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colormimi

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colormimi   发表于 2017-9-10 13:09:11 |栏目:仪器资料
确实是难得好帖啊,讓我涕流滿面,頂頂一起下吧先

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terencegoh

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terencegoh   发表于 2017-10-7 09:57:15 |栏目:仪器资料
珍惜生命,果断回帖;酌一杯清茶,品一起下吧资源

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51xixi

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51xixi   发表于 2017-10-28 08:05:26 |栏目:仪器资料
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ivvn

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ivvn   发表于 2017-11-22 05:53:51 |栏目:仪器资料
我帶著醬油瓶路過一起下吧的,還是忍不住小手一抖!

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知鸟

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知鸟   发表于 2018-8-11 05:48:22 |栏目:仪器资料
啥也不说了,感谢一起下吧和楼主的分享哇!

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007995

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007995   发表于 2018-10-1 06:45:31 |栏目:仪器资料
这个資源一般般,不過我喜歡

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bosswin

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bosswin   发表于 2018-11-20 20:45:04 |栏目:仪器资料
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路漫漫

等待验证会员

路漫漫   发表于 2019-1-12 13:34:37 |栏目:仪器资料
這麼好的帖子都沒有人頂!d=====( ̄▽ ̄*)b,我來多頂頂樓主

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眼儿

氦级

眼儿   发表于 2019-3-12 10:20:35 |栏目:仪器资料
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