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淳于癫   发表于 2019-5-29 18:41:07 |栏目:书籍推荐 |分类:生命科学
  • 书籍名称 :分子克隆实验指南 第4版
  • 编著人员 : J.萨姆布鲁克、M.R.格林著 贺福初译
  • 出版单位 : 科学技术出版社
  • 出版时间 : 2017
  • 涉及领域: 医药书籍 » 生命科学书籍
  • 推荐等级: ★★★★
分子克隆实验指南第4版(上中下册合集) J.萨姆布鲁克、M.R.格林著 贺福初译
分子克隆技术30多年来一直是全球生命科学领域实验室专业技术的基础。冷泉港实验室出版的《分子克隆实验指南》一书拥有的可靠性和*性,使本书成为业内*流行、*具影响力的实验室操作指南。第四版的《分子克隆实验指南》保留了之前版本中备受赞誉的细节和准确性,10个原有的核心章节经过更新,反映了标准技术的发展和创新,并介绍了一些前沿的操作步骤。同时还修订了第三版中的核心章节,以突出现有的核酸制备和克隆、基因转移及表达分析的策略和方法,并增加了12个新章节,专门介绍*激动人心的研究策略,包括利用 DNA 甲基化技术和染色质免疫沉淀的表观遗传学分析、RNAi、新一代测序技术,以及如何处理数据生成和分析的生物信息学,例如介绍了分析工具的使用,如何比较基因和蛋白质的序列,鉴定多个基因的常见表达模式等。本书还保留了必不可少的附录:包括试剂和缓冲液、常用技术、检测系统、一般安全原则和危险材料。任何使用分子生物学技术的基础研究实验室都将因拥有一册《分子克隆实验指南》而受益。本书可作为学习遗传学、分子细胞生物学、发育生物学、微生物学、神经科学和免疫学等学科的重要指导,可供生物学、医药卫生,以及农、林、牧、渔、检验检疫等方面的科研、教学与技术人员参考。
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目录
《分子克隆实验指南·上册》目录:
第1章DNA的分离及定量
导言
方案1SDS碱裂解法制备质粒DNA:少量制备
方案2SDS碱裂解法制备质粒DNA:大量制备
方案3从革兰氏阴性菌(如E.coli)中分离DNA
方案4乙醇法沉淀DNA
方案5异丙醇法沉淀DNA
方案6用微量浓缩机进行核酸的浓缩和脱盐
方案7丁醇抽提法浓缩核酸
方案8聚乙二醇沉淀法制备M13噬菌体单链DNA
方案9M13噬菌体铺平板
方案10M13噬菌体液体培养
方案11M13噬菌体双链(复制型)DNA的制备
方案12利用有机溶剂分离纯化高分子质量DNA
方案13用蛋白酶K和苯酚从哺乳动物细胞中分离高分子质量DNA
方案14一步法同时提取细胞或组织中的DNA、RNA和蛋白质
方案15从鼠尾或其他小样本中制备基因组DNA
替代方案:不使用有机溶剂从鼠尾分离DNA
替代方案:一管法从鼠尾中分离DNA
方案16快速分离酵母DNA
方案17微型凝胶电泳后使用溴化乙锭(EB)估算条带中DNA数量
方案18利用Hoechst33258通过荧光分析仪估算DNA浓度
方案19用PicoGreen定量溶液中的DNA
信息栏
第2章DNA分析
导言
方案1琼脂糖凝胶电泳
方案2琼脂糖凝胶中DNA的染色检测
方案3聚丙烯酰胺凝胶电泳
方案4聚丙烯酰胺凝胶中DNA的染色检测
方案5聚丙烯酰胺凝胶中DNA的放射自显影检测
方案6碱性琼脂糖凝胶电泳
附加方案:碱性琼脂糖凝胶的放射自显影
方案7成像:放射自显影和感光成像
方案8用玻璃珠从琼脂糖凝胶中回收DNA
方案9低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收:有机溶剂抽提法
方案10聚丙烯酰胺凝胶中DNA片段的回收:压碎与浸泡法
方案11Southern印迹
方案12Southcm印迹:DNA从一块琼脂糖凝胶同时向两张膜转移
方案13采用放射性标记探针对固定在膜上的核酸DNA进行Southern杂交
附加方案:从膜上洗脱探针
信息栏
第3章质粒载体克隆与转化
导言
方案1制备和转化感受态大肠杆菌的Hanahan方法:高效转化策略
方案2制备和转化感受态大肠杆菌的Inoue方法:“超级感受态”细胞
方案3大肠杆菌的简单转化:纳米颗粒介导的转化
替代方案:一步法制备感受态大肠杆菌:在同一溶液中转化和储存细菌细胞
方案4电穿孔法转化大肠杆菌
方案5质粒载体克隆:定向克隆
方案6质粒载体克隆:平末端克隆
方案7质粒DNA的去磷酸化
方案8向平末端DNA添加磷酸化衔接子/接头
方案9克隆PCR产物:向扩增DNA的末端添加限制性酶切位点
方案10克隆PCR产物:平末端克隆
方案11克隆PCR产物:制备T载体
方案12克隆PCR产物:TA克隆
方案13克隆PCR产物:TOPOTA克隆
方案14使用X—Gal和IPTG筛选细菌菌落:α—互补
信息栏
第4章Gateway重组克隆
导言
方案1扩增Gateway载体
方案2制备可读框入门克隆和目的克隆
方案3应用多位点LR克隆反应制备目的克隆
信息栏
第5章细菌人工染色体及其他高容量载体的应用
导言
方案1BAC DNA的小量分离和PCR检验
方案2BAC DNA的大量制备和线性化
方案3通过脉冲电场凝胶电泳检验BAC DNA的质量和数量
方案4两步BAC工程:穿梭载体DNA的制各
方案5A同源臂(A—Box)和B同源臂(B—Box)的制备
方案6克隆A和B同源臂到穿梭载体
方案7重组穿梭载体的制备和检验
方案8通过电穿孔法转化重组穿梭载体到感受态BAC宿主细胞
方案9共合体的检验和重组BAC克隆的筛选
方案10一步BAC修饰:质粒制备
方案11A同源臂(A—Box)的制备
方案12克隆A同源臂到报道穿梭载体
方案13用RecA载体转化BAC宿主
方案14转移报道载体到BAC/RecA细胞以及共合体的筛选
方案15酿酒酵母(S.cerevisiae)的生长和DNA制备
方案16酵母DNA的小量制备
信息栏
第6章真核细胞RNA的提取、纯化和分析
导言
方案1从哺乳动物的细胞和组织中提取总RNA
替代方案从小量样本提取RNA
方案2从斑马鱼胚胎和成体中提取总RNA
方案3从黑腹果蝇提取总RNA
方案4从秀丽隐杆线虫中提取总RNA
方案5从酿酒酵母菌中采用热酸酚提取总RNA
方案6RNA定量和储存
方案7RNA的乙醇沉淀
方案8通过无RNase的DNaseI处理去除RNA样品中的DNA污染
方案9Oligo(dT)磁珠法提取poly(A)+mRNA
方案10按照大小分离RNA:含甲醛的琼脂糖凝胶电泳
方案11根据分子质量大小分离RNA:RNA的尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
方案12琼脂糖凝胶中变性RNA的转膜和固定
替代方案下行毛细管转移
方案13聚丙烯酰胺凝胶的电转移和膜固定
方案14Northern杂交
方案15纯化RNA的点杂交和狭缝杂交
方案16用核酸酶S1对RNA作图
方案17核糖核酸酶保护分析:用核糖核酸酶和放射性标记的RNA探针对RNA作图
方案18引物延伸法分析RNA
信息栏
第7章聚合酶链反应
导言
方案1基础PCR
方案2热启动PCR
方案3降落PCR
方案4高GC含量模板的PCR扩增
方案5长片段高保真PCR(LAPCR)
方案6反向PCR
方案7巢式PCR
方案8mRNA反转录产物cDNA的扩增:两步法RT—PCR
方案9由mRNA的5’端进行序列的快速扩增:5’—RACE
方案10由mRNA的3’端进行序列的快速扩增:3’—RACE
方案11使用PCR筛选克隆
信息栏
第8章生物信息学
导言
方案1使用UCSC基因组浏览器将基因组注释可视化
方案2使用BLAST和ClustaIW进行序列比对和同源性检索
方案3使用Primer3Plus设计PCR引物
方案4使用微阵列和RNA—seq进行表达序列谱分析
方案5将上亿短读段定位至参考基因组上
方案6识别ChIP—seq数据集中富集的区域(寻峰)
方案7发现顺式调控基序
信息栏
……
《分子克隆实验指南·中册》
《分子克隆实验指南·下册》

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